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紫外分析儀用途和日常維護保養方法

發布時間: 2017-02-09  點擊次數: 2106次

紫外分析儀(yi) 用途和日常維護保養(yang) 方法

一、紫外分析儀(yi) 是熒光技術的應用

    熒光技術是什麽(me) 呢?  首先了解一下什麽(me) 是熒光,熒光又作“螢光”,是指一種光致發光的冷發光現象。當某種常溫物質經某種波長的入射光(通常是紫外線或X射線)照射,吸收光能後進入激發態,並且立即退激發並發出比入射光的的波長長的出射光(通常波長在可見光波段);而且一旦停止入射光,發光現象也隨之立即消失。具有這種性質的出射光就被稱之為(wei) 熒光。  知道了什麽(me) 是熒光,顧名思義(yi) 就能想到什麽(me) 是熒光技術。熒光技術是某些物質受一定波長的光激發後,在極短時間內(nei) (10-8秒)會(hui) 發射出波長大於(yu) 激發波長的光,這種光稱為(wei) 熒光。這一發光現象在各方麵的應用及有關(guan) 的方法稱為(wei) 熒光技術(fluorescent technique)。 
  物質經過紫外線照射後發出熒光的現象可分為(wei) 兩(liang) 種情況,*種是自發熒光,如葉綠素、血紅素等經紫外線照射後,能發出紅色的熒光,稱為(wei) 自發熒光;第二種是誘發熒光,即物體(ti) 經熒光染料染色後再通過紫外線照射發出熒光,稱為(wei) 誘發熒光。 
  熒光技術在生物化學及分子生物學研究中應用主要包括以下幾個(ge) 方麵:  
  1、物質的定性:不同的熒光物質有不同的激發光譜和發射光譜,因此可用熒光進行物質的鑒別。與(yu) 吸收光譜法相比,熒光法具有更高的選擇性。  
  2、定量測定:利用在較低濃度下熒光強度與(yu) 樣品濃度成正比這一關(guan) 係可以定量分析樣品中熒光組分的含量,常用於(yu) 測定氨基酸、蛋白質、核酸的含量。熒光定量測定的一個(ge) 優(you) 點是靈敏度高,例如維生素B2的測定*可達1毫微克/毫升,這一優(you) 點使測定時所需要樣品量大大減少。  這種定量測定方法還可應用於(yu) 酶催化的反應,隻要反應前後有熒光強度的變化,就可用來測定酶的含量及酶反應的速率等。  
  3、研究生物大分子的物理化學特性及其分子的結構和構象:熒光的激發光譜、發射光譜、量子產(chan) 率和熒光壽命等參數不僅(jin) 和分子內(nei) 熒光發色基團的本身結構有關(guan) ,而且還強烈地依賴於(yu) 發色團周圍的環境,即對周圍環境十分敏感。利用此特點可通過測定上述有關(guan) 熒光參數的變化來研究熒光發色團所在部位的微環境的特征及其變化。在此研究中,除了利用生物大分子本身具有的熒光發色團(如色氨酸、酪氨酸、鳥苷酸等,此類熒光稱為(wei) 內(nei) 源熒光)以外,可將一些特殊的熒光染料分子共價(jia) 地結合或吸附在生物大分子的某一部位,通過測定該染料分子的熒光特性變化來研究生物大分子,這種染料分子被稱為(wei) “熒光探針”,它們(men) 發出的熒光一般稱為(wei) 外源熒光。熒光探針的應用,大大地開拓了熒光技術在分子生物學中的應用範圍。   
  4、利用熒光壽命、量子產(chan) 率等參數可以研究生物大分子中的能量轉移現象:通過該現象的研究,可以獲得生物大分子內(nei) 部的許多信息。 
  以往人們(men) 常用熒光偏振做指標來研究生物大分子動力學。人們(men) 趨於(yu) 用熒光偏振隨時間的衰減來研究這些問題。在這種方法中,激發光不是一連續的麵偏振光,而是一偏振的光脈衝(chong) ,因此測得的F∥和F是在兩(liang) 個(ge) 不同方向上偏振的熒光隨時間的衰減,它既和熒光壽命τ有關(guan) ,又與(yu) 分子在溶液中的運動有關(guan) ,因此常表示為(wei) F∥(t)和F⊥(t)。由它們(men) 可得一相當重要的物理量——各向異性參數A(t)。由A(t)可推測生物大分子的形狀、分子轉動弛豫時間(即從(cong) 一個(ge) 定向的狀態到一個(ge) 無定向狀態所要的時間),進而可以推知生物大分子的大小、分子在溶液中的轉動角度和時間之間的函數關(guan) 係。由這些結果可以研究分子之間的相互作用、分子間結合的緊密程度、蛋白質、核酸分子的解聚程度等等。  

二、日常維護保養(yang) 方法

1. 本儀(yi) 器要放置在陰涼、幹燥、無灰塵和無酸堿、蒸汽的地方。

2. 放置被觀察物的紫玻璃和黑板上如有汙穢,可用酒精棉球擦幹淨。